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    如何正確使用細胞凍存液進行細胞凍存?

    更新時間:2024-01-15   點擊次數:140次
      細胞凍存是將細胞置于低溫下保存的過程,以延長其存活時間和保持其功能活性。正確使用進行細胞凍存是確保細胞存活和質量的關鍵步驟。下面是一些正確使用細胞凍存液進行細胞凍存的步驟:
     
      1、準備細胞:首先,需要選擇適合冷凍保存的細胞類型,并確保其生長狀態良好。通常,最好在細胞達到對數生長期時進行凍存。
     
      2、洗滌細胞:將培養基從培養瓶或培養皿中倒掉,用無菌PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)洗滌細胞兩次,以去除殘留的培養基和血清。
     
      3、收集細胞:使用合適的方法收集細胞,例如通過離心使細胞沉淀,然后用無菌移液管輕輕吸出細胞。
     
      4、懸浮細胞:將收集到的細胞懸液轉移到含有適當體積的細胞凍存液中。通常,它的濃度為10%DMSO(二甲亞砜)+90%基礎培養基??梢愿鶕煌毎愋秃蛯嶒炇业囊筮M行調整。
     

    細胞凍存液

     

      5、混合細胞:將細胞懸液與其充分混合,確保每個細胞都被均勻涂覆??梢允褂眯D器或手動輕輕搖動來混合。
     
      6、分裝細胞:根據需要,將混合好的細胞懸液分裝到凍存管中。每個凍存管中的體積應根據細胞類型和預期的復蘇次數來確定。通常,每個凍存管中的體積不應超過總體積的10%。
     
      7、標記和記錄:在每個凍存管上標記細胞的名稱、日期和凍存編號等信息。同時,還應記錄有關細胞的信息,如來源、種類和傳代次數等。
     
      8、冷凍細胞:將分裝好的凍存管放入冷凍器中,逐漸降低溫度至-80°C或更低的溫度。降溫速率應控制在1°C/分鐘以下,以避免冰晶的形成對細胞造成損傷。
     
      9、儲存細胞:將冷凍的細胞存放在-80°C或更低的溫度下的冷凍器中。確保冷凍器的溫度穩定且無振動或其他干擾因素。
     
      總之,正確使用細胞凍存液進行細胞凍存需要注意選擇合適的細胞類型、控制降溫速率、避免污染和振動等因素,以確保細胞的存活和質量。




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